細胞自噬形成全新檢測工具 — 磷酸化 ATG16L1 重組兔單株抗體

突破!細胞自噬形成全新檢測工具

自噬作用 (autophagy) 是維持細胞恆定的重要機制,已有多種疾病證實與自噬作用具有關連性。然而由於現有檢測工具的侷限性,自噬作用速率的檢測與分析仍十分具有挑戰性,特別是在稀有細胞群體或生物體內。

2019 年 11 月 25 日,加拿大渥太華大學 (University of Ottawa) Ryan C. Russell 研究團隊於知名科學期刊《Nature Methods》發表了一個能夠用來監測細胞內自噬作用活化程度的關鍵抗體,此抗體有望成為研究細胞自噬形成的嶄新工具,並為開發細胞自噬相關疾病診斷與治療方法帶來強大助力。

An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods. 2019 Nov 25.

此關鍵抗體是由渥太華大學研究團隊與 Abcam 所共同研發,採用了 RabMAb® 兔單株抗體製程技術,能夠高度專一且有效地辨識磷酸化的 ATG16L1 蛋白 (phospho-ATG16L1)。由於 phospho-ATG16L1 僅會存在於新形成的自噬體 (autophagosome) 中,因此使用 phospho-ATG16L1 抗體作為檢測細胞自噬作用的工具,其優勢之一就是分析結果不會受到長時間壓力或後期細胞自噬阻滯的影響,這兩者皆會混淆自噬作用的分析結果。除此之外,藉由多項自噬作用誘導因子的測試,也證實 ATG16L1 蛋白的磷酸化為自噬作用發生時的高度保留訊息傳導路徑,顯示 phospho-ATG16L1 抗體亦可作為研究細胞自噬形成調控藥物的靈敏工具。

渥太華大學研究團隊與 Abcam 所共同開發的 phospho-ATG16L1 抗體 (ab195242),秉持有 RabMAb® 重組兔單株抗體的優勢特性 — 卓越的抗原識別能力、高度專一性、以及批次間的絕佳穩定一致性等,並且能夠適用於西方墨點 (Western blot, WB)、免疫螢光染色 (Immunofluorescence, IF)、免疫組織化學染色 (Immunohistochemistry, IHC) 等多種應用實驗,同時研究團隊也證實 phospho-ATG16L1 表現量可直接反應細胞內自噬作用形成速率的變化情形,因此對研究自噬作用或自噬形成的研究者們來說,phospho-ATG16L1 抗體 (ab195242) 將是一個靈敏且便利的檢測工具。

IHC images of mice quadricep showing either pATG16L1 (ab195242) or LC3B staining.

IF showing pATG16L1 (ab195242) (red), LC3B (green) and p62 (white).

WB showing pATG16L1 (ab195242), ATG16L1 and LC3B.
Smaple: HCT116 wild-type and ATG16L1 knockout cells incubated with either complete media or amino acid deficient DMEM.

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