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友善列印TSA Systems for Immunohistochemistry
and In Situ Hybridization

TSA (Tyramide Signal Amplification) 訊號放大技術是由美商 PerkinElmer 所研發的專利技術,可廣泛應用在 ISH、IHC 等實驗中,具有提高訊號強度、增加偵測靈敏度、減少抗體或探針使用量等多項優點。使用時不需大幅變動原本的實驗流程,僅需增加 HRP 酵素與 TSA 訊號放大試劑的使用步驟,即可輕鬆享受靈敏度提升、抗體 (探針) 使用量減少的優勢與便利。至目前為止 TSA 訊號放大技術已累積有上千篇的文獻發表紀錄,是非常值得信賴採用的優質技術。

 

作用原理:

二級抗體上所帶有的 HRP 酵素可將 TSA 訊號放大技術的核心成員 "Tyramide 分子" 活化,活化後的 Tyramide 會變得極不穩定並迅速地與鄰近蛋白質上的 Tyrosine 產生共價鍵結恢復成穩定狀態,使得 Tyramide 可大量集中在目標分子 (DNA, RNA, or Protein) 附近,不會有增加背景值的虞慮。藉由在 Tyramide 上標定螢光 (如 Fluorescein、Cy3) 或半抗原 (如 Biotin、DNP) 即可使得目標分子上表現有大量的螢光 (fluorescent) 或呈色 (chromogenic) 訊號,進而達到訊號放大的效果。

 

滿足偵測多個目標分子的實驗需求 (Multi-Target Detection)

採用 TSA 訊號放大技術可以讓您在相同樣品上偵測多種不同目標分子,例如下圖即是美國華盛頓大學醫學院的 Zaidi A.U. 博士使用不同螢光標定的 Tyramide 分子在同一片小鼠胚胎神經節組織切片上先後進行 GFRα2 基因以及 Ret 蛋白質的免疫偵測實驗 (ISH → IHC)。其研究成果突破了以往 ISH 以及 IHC 實驗只能獨立進行的限制,提供另一種研究目標基因與蛋白質分子之間相互作用的實驗平台。[J Histochem Cytochem. 2000 Oct;48(10):1369-75]

 

TSA® Multiplex Kit 讓多重染色更清晰便利!

  • 可同時偵測多種 biomarkers!可在單壹 FFPE 組織切片上同時偵測多種生物標記。
  • 可使用同一物種來源的 Primary Antibody,擺脫 Crosstalk 疑慮與限制!TSA® Multiplex Kit 多重染色實驗流程中,會先透過「微波」處理去除組織樣本上前一個待測標的的偵測抗體,接著才會進行下一個待測標的的抗體結合反應,因此不必擔心抗體間會有交叉反應。
  • 提供訊號放大效果,節省珍貴樣本與抗體用量!TSA® 核心試劑「帶有螢光標定的 Tyramide 分子」會大量且準確地鍵結於待測標的附近,使待測標的表現有大量的螢光,進而達到訊號放大效果。

 


TSA® Multiplex Kit 多重染色原理:首先以第一個待測標的之專一性一級抗體進行辨識,接著加入帶有 HRP 酵素的二級抗體,使 TSA® 核心試劑「帶有螢光標定的 Tyramide 分子」活化鍵結於待測標的附近,進而使得待測標的標記上大量的特定螢光訊號。欲標記下一個待測標的之前,僅需利用「微波」處理去除組織樣本上的抗體,由於 Tyramide 與待測標的間為共價鍵結,螢光訊號不受微波影響,能在抗體去除後保留訊號,因此在進行下一個待測標的之抗體結合-螢光標記反應的同時,仍可完整保留前一個待測標的之螢光訊號。

 

讓隱藏的基因調控者 microRNA 無所遁形

microRNA 是近幾年最熱門的基因調控研究對象,它可以藉由與標的 mRNA 的配對結合來調控此基因的表現。然而若想以 ISH 技術來研究 microRNA 在組織中的表現情形,往往會受限於 microRNA 序列長度僅有 22nt 左右而變得難以偵測。丹麥哥本哈根大學的 Silahtaroglu A.N. 博士在 2007 年「Nature Protocols」期刊上發表了一套完整的實驗流程,可以讓研究人員在 6 小時內於組織切片中成功地偵測得 microRNA 的表現量。其方法搭配使用了 TSA 訊號放大技術以及鎖核酸探針 (Locked Nucleic Acid, LNA probe),相較於傳統 ISH 實驗,此實驗方式可以完美地呈現出高靈敏度、高解析度的 microRNA 偵測結果。[Nat Protoc. 2007;2(10):2520-8]

 

節省珍貴抗體或探針使用量

TSA 訊號放大技術不但可以幫助研究人員節省珍貴的抗體或探針使用量,同時可以得到相同或更佳的實驗結果。若採用新一代的【TSA Plus】系列產品,其偵測靈敏度比標準 TSA 產品提高 10~20 倍,是您節省抗體 (探針) 用量、偵測稀少分子的最佳選擇。

 

豐富文獻資源可供參照引用

TSA 訊號放大技術無論是在技術原理或是實驗應用上皆有許多文獻可供參照引用,歡迎向伯森各區域業務專員索取,或至 PerkinElmer 原廠網站文獻資料庫查詢。

 

訂購資訊

Product Pack Size Cat. No.
TSA® Singleplex Kit, 可見光系統
TSA Biotin System for 50-150 slides PK-NEL700A
for 200-600 slides PK-NEL700
TSA Plus Biotin Kit for 50-150 slides PK-NEL749A
for 250-750 slides PK-NEL749B
TSA Plus DIG Reagent Kit for 50-150 slides PK-NEL748
for 250-750 slides PK-NEL748B
TSA Plus DNP (AP) System for 25-75 slides PK-NEL746B
for 50-150 slides PK-NEL746A
TSA Plus DNP (HRP) System for 25-75 slides PK-NEL747B
for 50-150 slides PK-NEL747A
TSA® Singleplex Kit, 螢光系統
TSA Coumarin System for 100-300 slides PK-NEL703
TSA Cyanine 3 System for 50-150 slides PK-NEL704A
TSA Cyanine 5 System for 50-150 slides PK-NEL705A
TSA Fluorescein System for 50-150 slides PK-NEL701A
for 100-300 slides PK-NEL701
TSA Tetramethylrhodamine (TMR) System for 100-300 slides PK-NEL702
TSA Plus Cyanine 3 System for 25-75 slides PK-NEL744E
for 50-150 slides PK-NEL744
for 250-750 slides PK-NEL744B
TSA Plus Cyanine 3.5 System for 50-150 slides PK-NEL763
for 250-750 slides PK-NEL763B
TSA Plus Cyanine 5 System for 25-75 slides PK-NEL745E
for 50-150 slides PK-NEL745
for 250-750 slides PK-NEL745B
TSA Plus Cyanine 5.5 System for 50-150 slides PK-NEL766
for 250-750 slides PK-NEL766B
TSA Plus Fluorescein System for 25-75 slides PK-NEL741E
for 50-150 slides PK-NEL741
for 250-750 slides PK-NEL741B
TSA Plus Tetramethylrhodamine (TMR) System for 50-150 slides PK-NEL742
for 250-750 slides PK-NEL742B
TSA® Multiplex Kit, 螢光系統
TSA Plus Cyanine 3 & Cyanine 5 System for 50-150 slides PK-NEL752
TSA Plus Cyanine 3 & Fluorescein System for 50-150 slides PK-NEL753
TSA Plus Cyanine 5 & Flourescein System for 50-150 slides PK-NEL754
TSA Plus Fluorescein & Tetramethylrhodamine (TMR) System for 50-150 slides PK-NEL756
TSA 4-color Automation IHC Kit¹ for 50 slides PK-NEL800
TSA 4-color Manual IHC Kit² for 50 slides PK-NEL810
  1. Include TSA fluorophores (520, 570, 670 nm) and DAPI.
  2. Include TSA fluorophores (520, 570, 670 nm), DAPI, and AR6 buffer.
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