別讓實驗敗在抗體失效！
這 5 個抗體保存要點你 follow 了嗎？

一般來說，收到抗體後，抗體可以在 4°C 下保存 1~2 週。若想長期保存，可以在收到抗體時先以 10,000 x g 的離心力離心 20 秒，排出卡在小瓶螺紋裡的溶液，然後分裝至低蛋白結合的微量離心管中。分裝可以最大程度地減少因反覆凍融 (freeze-thaw)* 造成的損失，還可以避免操作過程中整罐抗體被污染的風險。 ※反覆凍融會使抗體變性，導致抗體形成聚合物，降低抗體的結合能力。

抗體經過分裝後，通常建議保存在 -20°C (在 -80°C 保存並不會增加多少優勢)，然而由於抗體特性不一，請務必查看 Datasheet，獲取具體的保存溫度建議。例如，Abcam Carrier-free 無載體 (不含 BSA 和 Azide) 系列抗體有些品項就不能冷凍，只能在 4°C 下保存。

分裝後的抗體應只有經過凍融過程一次，如果在解凍使用後還有剩餘的，則建議在 4°C 下保存，並儘快使用完畢。

分裝量的多少則取決於每次實驗的抗體常規用量，然而建議不要少於 10 μl。因為分裝量太少，就容易受到蒸發影響使濃度遽增，如此一來抗體容易附著在管壁上，造成損失。

• 儘可能避免使用無霜冰箱保存抗體，因其作用原理容易造成抗體反覆凍融。此外，抗體應存放於冰箱溫度變化最小的區域，例如冰箱內側靠後方後壁處，而非冰箱門處。
• 使用抗凍劑 - 由於甘油 (Glycerol) 可以將冰點降低至 -20°C 以下，因此有些研究人員會在抗體中加入等體積的甘油作為抗凍劑使用，以減少抗體因反覆凍融造成的損失。雖然大部分的情況下這種做法是可行的，然而仍應在實施前先行查閱產品 Datasheet，確認製造商是否有測試過抗體在這種保存條件下的穩定性*。要特別提醒的是，由於 -80°C 低於甘油的冰點，所以不建議在 -80°C 下保存添加有甘油的抗體。此外，考量甘油或其他冷凍保護劑有被細菌污染的可能，務必在使用前對其進行無菌處理。
  ※若您在 Abcam Datasheet 中無法找到相關資訊，歡迎直接洽詢伯森業務專員。

比起一般未標定抗體，標定抗體在保存上有更多需要注意的地方，例如：無論是螢光標定抗體或是常見的 HRP-, AP- 酵素標定抗體，曝露在光線下都會對其活性造成損傷，因此需要保存在深色瓶內，或是以鋁箔紙包裹。螢光標定抗體還需要特別注意光漂白 (Photobleaching) 的問題，整過實驗過程均應避光操作。更多標定抗體保存建議，請見下方表格說明。

為防止微生物污染，您可以在抗體溶液中添加疊氮化鈉 (Sodium azide)（終濃度 0.02%）。 如果抗體已經包含該抑菌防腐劑，您可以在產品 Datasheet 的「儲存緩衝液 (Storage buffer)」部分找到相關說明。

⚠︎ 哪些時候應避免使用疊氮化鈉呢？

• 利用抗體對活細胞進行染色或加藥處理時、或是將抗體用於活體 (in vivo) 研究時，皆應避免使用疊氮化納，因其會阻斷細胞色素 (Cytochrome) 的電子傳遞系統，對生物造成毒性。
• 要對抗體進行標定時，也應避免溶液中含有疊氮化納，因其會干擾胺基 (Amine) 鍵結反應。此時您可以改使用 0.01% 硫柳汞 (Thimerosal) 作為抗體的防腐劑，因其不含一級胺 (Primary amine)；或者利用透析 (Dialysis)、超過濾 (Ultrafiltration) 或膠體過濾層析 (Gel filtration) 等方式先行移除抗體溶液中的疊氮化納，待完成標定反應後，再將標定抗體保存於疊氮化鈉中。
• HRP 酵素標定抗體不能使用疊氮化納作為防腐劑，因其會抑制 HRP 酵素活性。

一般來說，蛋白質在較高濃度下比較不容易降解，理想的抗體保存濃度為 ≥1 mg/ml。應避免讓稀釋至工作濃度的抗體於 4°C 儲存超過一天。

如果抗體濃度很低，可以在抗體溶液中添加蛋白穩定劑，例如牛血清白蛋白 (BSA)。蛋白穩定劑可以吸附在管壁上，讓抗體損失降至最低。需特別提醒的是，由於蛋白穩定劑會和抗體競爭，降低結合效率，所以如果您準備要對抗體進行標定，就不要在抗體中添加蛋白穩定劑。

以上就是 Abcam 團隊針對抗體保存整理出的 5 個重點，您可透過下方連結瀏覽更多相關資訊。完整技術支援服務與最新活動訊息，歡迎洽詢 Abcam 台灣代理伯森生技。

• Abcam Product Storage Overview
• 更多免疫實驗工具相關報導
• Abcam 最新促銷優惠活動
• Abcam 產品快速導覽