AlphaLISA Epigenetics Reagents

AlphaLISA Epigenetics Reagents 是由 Alpha 技術所延伸出來的便利產品，可適用於偵測 Peptide 或 Full-length 型式的 Histone 蛋白。具有高度專一性，可藉由偵測各種後轉譯修飾類型的 Histone 蛋白，精確定量組蛋白密碼 (histone code) 調控者 (例如 Acetyltransferase, Methyltransferase, Deacetylase, Demethylase) 的酵素活性。與 ELISA 產品相比，AlphaLISA 偵測試劑具有更加寬廣的偵測區間，可減少樣本稀釋比例的測試步驟；並且具有更精簡快速的實驗流程，讓研究者能夠更快取得定量結果。

作用原理：

AlphaLISA 偵測技術是由兩種核心物質所組成，一為 Donor bead，另一為 Acceptor bead。Donor bead 本身身帶有光敏感物質 "Phthalocyanine"，因此當以 680 nm 雷射光激發 Donor bead 時，此光敏感物質可催化周遭的氧分子形成活化態，並於作用範圍內激發鄰近的 Acceptor bead 產生化學冷光反應，此冷光能量會進一步轉移至 Acceptor bead 本身所帶有的螢光物質，使其最終產生 615 nm 螢光訊號。與其他偵測平台相比 (例如 FRET、TR-FRET)，AlphaLISA 技術的能量轉移有效距離長達 200 nm，因此不論是胜肽、重組蛋白、或是細胞內原始含有的蛋白質，皆可作為實驗偵測對象。具有專一性佳、靈敏度高、偵測區間廣泛以及流程簡單等多項優質特點。

在進行實驗時，研究者僅需自行準備 (1). 待測酵素與輔因子 (cofactor)、(2). 鍵結有 Biotin 的 Histone peptide substrate (或 Histone 全長蛋白)，即可開始進行實驗。此兩項所需試劑在產品應用文件中皆有詳盡的建議資訊，因此研究者可安心參照選購。

Excellent Specificity！左圖為 AlphaLISA anti-histone H3 K9me2 antibody Acceptor beads 的專一性測試結果。實驗證實此試劑的確能夠專一性地辨識偵測 H3K9me2 biotinylated peptide，並且無論是 H3K9me1 peptides、H3K9me3 peptides、methylated H3K4 peptides、unmodified H3 peptides，皆無法干擾反應產生偽陽性結果。   Well Validated！所有 Alpha 系列的 Histone modification 偵測試劑，皆實際使用特定酵素進行完整測試，具有詳盡的測試條件與實驗流程可供參照。例如左圖即是使用 G9a Histone H3-Lysine N-methyltransferase 所進行的酵素用量和時間反應測試結果，受測產品為 Anti-methyl-Histone H3 Lysine 9 (H3K9me2) AlphaLISA® Acceptor Beads (需同時搭配 Alpha Streptavidin Donor beads 等產品使用)。其他測試項目包含：Cofactor titration (ex, SAM)、Enzyme inhibition、Z'-factor determination.

訂購資訊
目前 Revvity 公司已針對 Histone H3 以及 p53 蛋白質的 Methyl 與 Acetyl 後轉譯修飾，推出多款 AlphaLISA 專一性偵測產品。由於產品品項新增快速，詳細產品應用與訂購資訊，歡迎洽詢伯森各區域業務專員。