基因表現晶片服務樣本製備建議

Gene Expression Microarray Service 可接受的樣本形式有：Total RNA、Cell、Tissue、Blood 四種，以下分別介紹其建議的樣本製備流程。若有任何疑問，歡迎隨時與我們聯繫。

Total RNA

• 樣本需求量：≥5 µg
• 濃度需求：≥0.2 μg/μl
• 品質需求：OD260/OD280 1.9~2.1
• 注意事項：請將樣本溶於 DEPC-H₂O 或 RNase-free H₂O 中，並將樣本保存於 -80°C 等待收件。送件時請隨附電泳圖，可以採用 1% denaturing agarose gel 電泳分析 28S rRNA 及 18S rRNA 的長度分布，其中 28S rRNA 的電泳位置 ~4.5 kb，18S rRNA 的電泳位置 ~1.9 kb。

Cell

• 樣本需求量：≥10⁶ cells
• 貼附型細胞製備流程：準備 10⁶ 個細胞，倒除培養液後不需 PBS 沖洗，直接加入 Trizol reagent (Invitrogen #15596-018; 10cm petri dish 約加入 3ml Trizol reagent)，將細胞溶解後保存於 -80°C 等待收件。
• 懸浮型細胞製備流程：約 5~10 x 10⁶ 個細胞加入 1ml Trizol reagent，將細胞溶解後保存於 -80°C 等待收件。

Tissue

• 樣本需求量：20 mg
• 液態氮保存法製備流程：準備 20mg 的組織塊，大小約 0.5cm x 0.5cm x 0.5cm，先置於液態氮中快速冷凍，再將樣本放入專門存放液態氮的冷凍小管中 (請儘量使用抗凍冷凍小管)，再保存於液態氮筒中等待收件。
• RNAlater 保存法製備流程：準備 20mg 的組織塊，大小約 0.5cm x 0.5cm x 0.5cm，置於 1ml RNAlater 中於 4°C 儲存隔夜，再轉置保存於 -20°C 中等待收件。
• 注意事項：組織離開活體後請於 30 分鐘內保存於液態氮或 RNAlater 中，同時請提供 20mg 的組織即可，因組織塊若過大會不易自管中取出，使得操作時間拉長、或造成 RNAlater 滲透時間拉長，這些都有可能造成組織中的 RNA 降解 (degradation)。

Blood

• 樣本需求量：2.5 ml
• 製備流程：建議使用 PAXgene™ Blood RNA System (PreAnalytiX GmbH) 採集血液，詳細流程請參照原廠指示說明。採集於 PAXgene™ Blood RNA Tube 中的血液樣本可保存於 -20°C 中等待收件
• 所需採血裝置：PAXgene™ Blood RNA Tube、真空採血器、真空採血針、真空血液採集管 (作為 "Discard Tube"，BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube with Increased Silica, 13x75 mm, 4.0 ml)、酒精棉片、止血帶。