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友善列印LANCE Ultra Epigenetics Reagents

LANCE Ultra 是由 PerkinElmer 公司所開發的全均質化快速分析平台,可靈敏偵測 Histone peptide 的後轉譯修飾狀態,應用於研究找尋 Histone 後轉譯修飾作用的相關調控藥物與機制。

 

作用原理:

LANCE Ultra 偵測原理是利用帶有 Eu 螢光分子的抗體 (Eu-Ab)、以及帶有 ULight 螢光分子的 Streptavidin (ULight-SA),分別辨識 Histone peptide 上的後轉譯修飾、以及 Biotin 標定物。藉由兩者的專一性結合,可使 Eu 螢光分子靠近 ULight 螢光分子,此時以 320 nm 或 340 nm 雷射光激發 Eu 螢光分子,即可藉由能量轉移使鄰近的 ULight 螢光分子發射出 665 nm 的螢光訊號。

在進行實驗時,研究者僅需自行準備 (1). 待測酵素與輔因子 (cofactor)、(2). 鍵結有 Biotin 的 Histone peptide substrate,即可開始進行實驗。此兩項所需試劑在產品應用文件中皆有詳盡的建議資訊,因此研究者可安心參照選購。

 

It's so easy to detect modified histone with LANCE Ultra reagents*!
LANCE Ultra G9a Histone H3-Lysine N-methyltransferase Assay:【Step 1: Histone Methylation】Mix G9a enzyme, SAM, and Biotinylated histone H3 peptide (1-21). Incubate at room temperature, 30 min.【Step 2: LANCE Ultra Detection Reaction】Add Eu-Ab (anti-H3K9me2), ULight-SA and poly-L-lysine to "Step 1" reaction. Incubate at room temperature, 1 hr. Detect signal.

*由於 LANCE Ultra 偵測平台的能量轉移作用距離約僅有 10 nm,因此僅適用 peptide substrate 作為待測物。若欲直接偵測細胞內組蛋白修飾的含量,另有 AlphaLISA Epigenetics Reagents 可供使用。

Excellent Specificity!左圖為 LANCE Ultra Eu-Ab (anti-H3K9me2) 的專一性測試結果。實驗證實此試劑的確能夠專一性地辨識偵測 H3K9me2 biotinylated peptide,並且無論是 H3K9me1 peptides、H3K9me3 peptides、或是 methylated H3K4 peptides,皆無法干擾反應產生偽陽性結果。

 

訂購資訊
目前 PerkinElmer 公司已針對 Histone H3 以及 p53 蛋白質的 Methyl 與 Acetyl 後轉譯修飾,推出多款 LANCE Ultra 專一性偵測產品。由於產品品項新增快速,詳細產品應用與訂購資訊,歡迎洽詢伯森各區域業務專員。

Methyl Modifications
Mark Detected LANCE Ultra Eu-anti-mark Ab
Assay Points Cat. No.
H3K4 Unmodified 1,500
PK-TRF0404-D
15,625 PK-TRF0404-M
H3K4me1-2 1,500
PK-TRF0402-D
15,625 PK-TRF0402-M
H3K9me2 1,500
PK-TRF0403-D
15,625 PK-TRF0403-M
H3K27me2-1 1,500
PK-TRF0406-D
15,625 PK-TRF0406-M
H3K27me3 1,500
PK-TRF0407-D
15,625 PK-TRF0407-M
H3K36me2 1,500
PK-TRF0408-D
15,625 PK-TRF0408-M
Acetyl Modifications
Mark Detected LANCE Ultra Eu-anti-mark Ab
Assay Points Cat. No.
H3K4 Unmodified 1,500 PK-TRF0404-D
15,625 PK-TRF0404-M
H3K9ac 1,500 PK-TRF0400-D
15,625 PK-TRF0400-M
H3K27ac 1,500 PK-TRF0405-D
15,625 PK-TRF0405-M
p53 K382ac 1,500 PK-TRF0409-D
15,625 PK-TRF0406-M
備註:(1). 每個 Assay Point 是指使用 384-well 多孔盤,每個 well 內含有 25 µl 反應體積為計算。 (2). LANCE Ultra 系列產品皆屬於偵測試劑,並無提供 enzyme 與 substrate,若為原廠測試過品項,可提供您相關材料來源作為參考。
Additional Items Required
for LANCE Ultra histone modification assays
Product Assay Points Cat. No.
LANCE Ultra ULight-Streptavidin 1,000
PK-TRF0102-D
10,000 PK-TRF0102-M
100,000 PK-TRF0102-R
LANCE Detection Buffer, 10X 250 ml PK-CR97-102
 

 

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