GPCR 藥物研究新品:告別細胞膜製備,實現活細胞檢測

GPCR 藥物研究新品:

告別細胞膜製備,實現活細胞檢測

GPCR(G protein-coupled receptors, GPCRs) 是人體最大的膜蛋白家族,調節人體超過 60% 的生理功能,且目前約有三分之一的上市藥物是以 GPCR 為標靶,使其始終是全球藥物開發的核心。

在眾多訊號通路中,抑制性 G 蛋白(Gi protein)通路扮演著關鍵角色,其Gαi 亞基(Gαi subunit)負責將胞外訊號轉化為胞內反應。當受體被激活時, Gαi 會透過構型改變,將結合的 GDP 置換為 GTP,進而抑制腺苷酸環化酶(Adenylate Cyclase)活性、降低細胞內 cAMP 水平。因此,偵測 Gαi 與 GTP 的結合情況,是 GPCR 藥物篩選中極具代表性的功能性指標。​

以往的研究方法,會使用 GTPγS binding assay 來定量 Gαi 與 GTP 的結合,但這種實驗方法必須經過繁瑣的細胞膜製備(Membrane Prep),這不僅耗時費力,更常因操作變數導致數據再現性不佳,此外,使用細胞膜系統也難以完整模擬體內生理環境,導致實驗數據與活細胞表現存在落差。​

Revvity 新一代 HTRF® Cellular GTP / Gi protein Binding Kit 徹底解決了上述痛點。基於Revvity (Cisbio) HTRF® 技術,您可直接在活細胞中進行偵測。僅需將”活細胞”種於多孔盤內,培養 24 小時後進行通透化處理,並依序加入檢測混合液(含 MgCl₂、待測化合物、Eu 標記 GTP 與 d2 標記抗體),並室溫反應 4 小時即可讀取 665/620nm 螢光比值。這種 All-in-one plate 的流程,不僅免去了傳統膜製備的繁瑣步驟,更能在保留完整細胞環境的同時,確保實驗數據的高度精準與靈敏度。

HTRF® 技術在 GPCR 藥物篩選的優勢

  • Homogeneous add-and-read format: 均相檢測,混合後即可讀值。
  • No wash steps:無需洗滌,保留樣本完整性並簡化流程。
  • Low background:極低背景雜訊,確保高信噪比。
  • Straightforward miniaturization:優異的縮放性,支持從 96/384 孔盤至 1536 高密度孔盤的體積。
  • Stable signal:訊號穩定且具備讀值時間的靈活性。

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HTRF Cellular GTP / Gi protein Binding Kit

500 assay points

62CGTPPEG

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HTRF cAMP - Gs Dynamic kit

H1,000 tests

62AM4PEB

HTRF cAMP - Gs HiRange kit

1,000 tests

62AM6PEB

HTRF cAMP - Gi kit

1,000 tests

62AM9PEB

LANCE Ultra cAMP Detection Kit

1,000 Assay Points

TRF0262

HTRF IP-One - Gq kit

1,000 tests

62IPAPEB

HTRF β-arrestin 2 Recruitment Kit

1,000 Assay Points

62BDBAR2PEB


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